Анотація до роботи:

Ковтонюк О.В. Зміни протеїназно-інгібіторного балансу при рості злоякісних пухлин з індукованою резистентністю до цисплатину. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.01.07 – онкологія. – Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України, Київ – 2008.

Дисертаційна робота присвячена вивченню особливостей протеїназно-інгібіторного балансу в плазмі крові та пухлинній тканині в динаміці росту карциноми Герена та карциноми легені Льюїс з індукованою резистентністю до цисплатину.

В експериментах in vivo було показано, що зниження чутливості злоякісних пухлин до цисплатину супроводжується суттєвими змінами кінетики пухлинного росту: пролонгацією латентного періоду росту та підвищенням швидкості росту в експоненційній фазі. Встановлено, що зміна кінетики росту пухлин асоціюється з підвищенням сумарної протеолітичної активності (ПРА) і рівня б₁-інгібітора протеїназ (б₁-ІП) та зниженням рівня б₂-макроглобуліну (б₂М) в плазмі крові тварин. Виявлено пряму кореляційну залежність між об’ємом резистентних пухлин та рівнями ПРА і б₁-ІП в плазмі крові та пухлинній тканині. Cпіввідношення рівнів ПРА/б₁-ІП у плазмі крові та пухлинній тканині свідчить про суттєве зміщення протеїназно-інгібіторного балансу в бік підвищення ПРА при розвитку резистентності пухлин до цисплатину.

Показано, що формування резистентності карциноми легені Льюїс до цисплатину супроводжується підвищенням інтенсивності метастазування на фоні підвищення ПРА в плазмі крові та пухлинній тканині.

На експериментальних моделях карциноми Герена та карциноми легені Льюїс встановлено, що формування резистентності пухлин до цисплатину асоціюється зі змінами кінетики їх росту та супроводжується порушенням протеїназно-інгібіторного балансу в плазмі крові та пухлинній тканині.

1. Виявлено, що для резистентної до цисплатину карциноми Герена характерним є пролонгація латентного періоду росту пухлини (в 3,3 рази) та підвищення швидкості її росту в експоненційній фазі (в 2,0 рази) порівняно з вихідною пухлиною.

2. Встановлено, що в експоненційній фазі росту резистентної до цисплатину карциноми Герена в плазмі крові щурів зростають рівні ПРА (в 2,4 рази) і
   б₁-ІП (на 28,5%) та дещо знижується (на 18,0%) рівень б₂М порівняно з такими у тварин з вихідною пухлиною.

3. Встановлено, що кінетика росту та інтенсивність метастазування резистентної до цисплатину карциноми легені Льюїс визначається ступенем її резистентності: для пухлин з середнім і високим ступенем резистентності (LLC-19 та LLC-27) характерним є пролонгація латентного періоду росту пухлини (в 2,0 рази), підвищення швидкості росту в експоненційній фазі (в 3,4 і 3,7 рази, відповідно) та підвищення інтенсивності метастазування (LLC-27). Для пухлин з низьким ступенем резистентності (LLC-9) такі зміни не є характерними.

4. Встановлено, що в експоненційній фазі росту резистентної до цисплатину карциноми легені Льюїс зміна рівнів ПРА в плазмі крові визначається ступенем резистентності: для пухлин з низьким ступенем резистентності (LLC-9) характерним є незначне підвищення ПРА (в 1,4 рази), для пухлин з середнім (LLC-19) та високим (LLC-27) ступенем резистентності – значне підвищення ПРА (в 2,1 та 4,1 рази, відповідно). Розвиток резистентності пухлини до цитостатику супроводжується підвищенням рівня б₁-ІП (на 58,5% для пухлини LLC-27) в експоненційній фазі її росту та зниженням рівня б₂М в латентний період росту (на 27,2% для пухлини LLC-27).

5. Показано, що при рості резистентної до цисплатину карциноми легені Льюїс (LLC-27) в пухлинній тканині значно підвищується рівень ПРА (в 4,2 – 61,8 рази) у порівнянні з таким у вихідній пухлині, а вміст б₁-ІП, навпаки, знижується (на 49,5%).

6. Встановлено, що розвиток резистентності до цисплатину карциноми Герена та карциноми легені Льюїс супроводжується порушенням протеїназно-інгібіторного балансу в плазмі крові та пухлинній тканині в бік підвищення рівня ПРА.

7. В плазмі крові щурів з резистентною до цисплатину карциномою Герена, на відміну від вихідної пухлини, виявлено пряму кореляційну залежність між об’ємом пухлини та рівнями ПРА (rho = 0,7) і б₁-ІП (rho = 0,67). Визначено також пряму кореляційну залежність між об’ємом пухлини та рівнями ПРА (rho = 0,42) і б₁-ІП (rho = 0,65) в плазмі крові мишей з резистентною до цисплатину карциномою легені Льюїс (LLC-27). Аналогічний кореляційний зв’язок між об’ємом резистентної до цисплатину карциноми легені Льюїс та рівнями ПРА (rho = 0,5) і б₁-ІП (rho = 0,76) був виявлений безпосередньо і в пухлинній тканині.

Публікації автора:

1. Yurchenko O.V., Todor I.N., Tryndyak V.P., Tregubova N.A., Kovtonyuk O.V., Solyanik G.I., Kulik G.I., Chekhun V.F. Resistance of Guerin’s carcinoma cells to cisplatine: biochemical and morphological aspects // Exp. Oncol. – 2003. – Vol.25,
   № 1. – P. 64 – 68. (Особистий внесок здобувача: підібрано і проаналізовано наукову літературу за темою статті, здійснено аналіз та математичну обробку результатів дослідження, підготовлено роботу до друку).

2. Chekhun V.F., Kovtonyuk O.V., Todor I.N., Kulik G.I. Total proteolytic activity and levels of the main proteinases inhibitors in blood plasma of mice bearing Lewis lung carcinoma upon development of resistance to cisplatin // Exp. Oncol. – 2005. – Vol.27, №4. – P. 286 – 289. (Особистий внесок здобувача: проведено експериментальну частину роботи, самостійно визначено показники протеолітичної системи, вивчено кінетику росту пухлин, проведено статистичну обробку результатів, проаналізовано результати дослідження та підготовлено публікацію до друку).

3. Тодор И.Н., Кузьменко А.П., Трегубова Н.А., Трындяк В.П., Ковтонюк О.В., Кунская Л.Н., Стеблянко Т.И., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Лекарственная резистентность опухолей и метастазирование в эксперименте // Укр. мед. альманах. – 2006. – Т. 9, №4. – С.111 – 112. (Особистий внесок здобувача: проведено визначення протеолітичної активності та дослідження кінетики росту первинних пухлин).

4. Патент на винахід України 76922, (51) МПК (2006) G01N 33/50 A61K31/282 (2006.01). Спосіб виявлення чутливості злоякісних пухлин до дії цисплатину // Чехун В.Ф., Ковтонюк О.В., Тодор І.М., Кулик Г.І.. Заявл. 02.06.2005; Опубл. 15.09.2006. – Бюл. №9. – 8 с. (Особистий внесок здобувача: проведено планування схеми експерименту, самостійно визначено протеолітичну активність, проведено дослідження ефективності протипухлинної хіміотерапії, здійснено аналіз та математичну обробку результатів, підготовлено роботу до друку).

5. Ковтонюк О.В., Призимирська Т.В., Тодор І.М., Кулик Г.І., Чехун В.Ф. Дослідження активності серинових протеїназ та їх інгібіторів в плазмі крові мишей в динаміці розвитку карциноми 3LL з індукованою резистентністю до цисплатини // Тези VI конференції молодих онкологів України “Сучасні проблеми експериментальної та клінічної онкології”, 4–5 грудня 2003 р. – Київ. – 2003. – С. 24.

6. Тодор И.Н., Трегубова Н.А., Трындяк В.П., Ковтонюк О.В., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Особенности метаболизма и ультраструктуры метастазирующей карциномы легких Льюис при формировании резистентности к цисплатине // Материалы III Съезда онкологов и радиологов СНГ, 25 – 28 Мая 2004. – Минск. – 2004. – Ч. 1. – С.351.

7. Chekhun V.F., Kulik G.I., Todor I.N., Kovtonyuk O.V. Proteolytic activity and antiproteases at metastasis of cisplatin-sensitive and cisplatin-resistant Lewis lung carcinoma // Abstract Book. 18 European association for cancer research, 3 – 6 July
   2004. – Innsbruck, Austria. – 2004. – P. 320.

8. Kovtonyuk O.V., Chekhun V.F.,Todor I.N., Kulyk G.I. Character of changes in the total proteolytic activity and the content of main proteinase inhibitors in blood plasma of C57Bl/6 mice upon the cisplatin resistance development of Lewis lung carcinoma // International Student Congress of Medical Sciences, 15 – 18 June, 2005. – Groningen, The Netherlands. – 2005. – P. 54.

9. Ковтонюк О.В., Тодор І. М., Кулик Г. И., Чехун В.Ф. Протеолітична активність у плазмі крові мишей з карциномою легені Льюїс та щурів з карциномою Герена при формуванні резистентності до цисплатину // Тези ІІ науково-практичної конференції молодих вчених та спеціалістів “Актуальні проблеми фармакології та токсикології”, 22 грудня 2005 р. – Київ. – 2005. – С. 44.

10. Kovtonyuk O.V., Todor I.N., Kulik G.I., Chekhun V.F. Proteolytic activity and content of alpha-1-proteinase inhibitor upon the growth of mice with Lewis lung carcinoma in the blood plasma and tumor tissue // International Medical Students’ Congress Novi Sad. – Serbia. – 2006. – P. 20.

11. Kovtonyuk O.V., Chekhun V.F., Todor I.N., Kulyk G.I. Proteolytic activity and content of alpha-1-proteinase inhibitor in cisplatin-sensitive and cisplatin-resistant Lewis lung carcinoma // 17 European Student’s Conference: Abstract Book, 8 – 12 October, 2006, – Berlin, Germany / European Journal of Medical Research. – 2006. – Vol. 11. –
    P. 123 – 124.

12. Ковтонюк О.В., Чехун В.Ф., Тодор І.М., Кулик Г.І. Протеолітична активність та вміст б₁-інгібітору протеїназ в плазмі крові та тканині пухлини мишей при формуванні резистентності карциноми LLC до цисплатину // Матеріали всеукраїнської науково-практичної конференції з міжнародною участю: “Молекулярні основи і клінічні проблеми резистентності до лікарських засобів”,
    2 – 3 листопада 2006 р., Київ /Онкологія. – 2006. – Т. 5. № 2. – С. 177 – 178.

13. Чехун В.Ф., Ковтонюк О.В., Кулик Г.И., Тодор И.Н. Развитие лекарственной резистентности in vivo и активность компонентов системы протеолиза // Материалы съезда IV съезда онкологов и радиологов СНГ, 2006. – Баку: НЦО Минздрава Азербайджанской Республики, 2006. – С. 50.