Анотація до роботи:

АРТЕМЕНКО О.Ю. Вплив пероксиду водню на концентрацію кальцію в тимоцитах щура. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.02 – Біофізика. – Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Київ. – 2006.

Дисертація присвячена дослідженню концентрацій вільного Са²⁺ в цитозолі та мітохондріях та рН цитозолю на ранніх етапах дії різних концентрацій пероксиду водню в діапазоні від 10 до 100 мкМ/л.

Показано, що при зростанні температури від 12 до 32С підвищується ефект дії Н₂О₂ і швидкість накопичення іонів Са²⁺ в цитозолі збільшується в 12 раз. Вперше

встановлено відмінності в дії невеликих концентрацій пероксиду водню (10 мкмоль/л та 100 мкмоль/л) на зміну [Ca²⁺]_i в суспензії тимоцитів щура. Пероксид водню викликає дозозалежне підвищення концентрації іонів кальцію в мітохондріях тимоцитів. Встановлено, що ендоплазматичний ретикулум відіграє незначну роль у внутрішньоклітинному вивільненні іонів Са²⁺ при дії Н₂О₂. Показано, що при

обробці клітин дігітоніном (5 мкмоль/л) спостерігається зростання інтенсивності флуоресценції род-2, що свідчить про швидке накопичення іонів Са²⁺ в мітохондріях.

Протонофор СССР (2 мкмоль/л) спричиняє швидке зменшення концентрації іонів Са²⁺ в мітохондріях.

1. Досліджено флуоресцентним методом зміну концентрації іонів Са²⁺ в цитозолі і мітохондріях тимоцитів при дії різних концентрацій Н₂О₂. Показано, що при зростанні температури від 12⁰ до 32⁰С ефективність дії Н₂О₂ і швидкість накопичення іонів Са²⁺ в цитозолі та мітохондріях тимоцитів збільшується.

2. Встановлено, що при обробці клітин дігітоніном (5 мкмоль/л) спостерігається зростання інтенсивності флуоресценції род-2, що свідчить про накопичення іонів Са²⁺ в мітохондріях. Протонофор СССР (2 мкмоль/л) спричиняє зменшення концентрації іонів Са²⁺ в мітохондріях. Пероксид водню викликає дозозалежне підвищення концентрації іонів кальцію в мітохондріях тимоцитів.

3. Встановлено, що пероксид водню, при використаних концентраціях, не пошкоджує мембрани тимоцитів.

4. Досліджені кінетичні характеристики кальцієвого сигналу, спричиненого малими (10-25 мкмоль/л) і великими (50-100 мкмоль/л) концентраціями H₂O₂ в суспензіях тимоцитів щурів. Показано, що низька концентрація Н₂О₂ (10 мкмоль/л) викликає незначне збільшення концентрації цитозольного кальцію в тимоцитах, збільшені концентрації Н₂О₂ (більше 50 мкмоль/л) спричиняють значне зростання [Ca²⁺]_i .

5. Встановлено, що ендоплазматичний ретикулум відіграє незначну роль у внутрішньоклітинному вивільненні іонів Са²⁺ при дії Н₂О₂, основну роль у цьому процесі відіграють мітохондрії.

6. Показано, за допомогою рН чутливого флуоресцентного зонда BCECF, що низька концентрація Н₂О₂ (10 мкмоль/л) викликає незначне закислення () цитозолю в тимоцитах, тоді як більша концентрація Н₂О₂ (100 мкмоль/л) спричиняє значне закислення цитозолю ().

15

Публікації автора:

1. Семенов Ю. В., Артеменко О. Ю., Зима В. Л., Матишевська О. П. Вплив пероксиду водню на зміну цитозольного кальцію в тимоцитах щура // Фізика живого —2003. — №1, 11. — С. 58-63 (Особистий внесок здобувача – опрацювання літератури, виділення тимоцитів, навантаження клітин зондом, вимірювання концентрації Са²⁺ у цитозолі тимоцитів, аналіз та інтерпретація отриманих даних).

   Семенов Ю. В., Артеменко О. Ю., Зима В. Л., Ганчурін В. В. Флуоресцентний аналіз мітохондріального кальцієвого транспорту в тимоцитах // Фізика живого — 2003. —№2, 11. —С. 22-28. (Особистий внесок здобувача – опрацювання літератури, виділення тимоцитів, навантаження клітин зондом, вимірювання
   концентрації Са²⁺ у цитозолі тимоцитів, аналіз та інтерпретація отриманих даних).

   Артеменко О. Ю., Зима О. В. Дослідження кальцієвого транспорту в тимоцитах // Фізика живого. – 2004. — №2, 12. — С. 101-106 (Особистий внесок здобувача – опрацювання літератури, виділення тимоцитів, навантаження клітин зондом, вимірювання концентрації Са²⁺ у цитозолі тимоцитів, аналіз та інтерпретація отриманих даних).

   Зима В. Л., Омельянюк А. М., Філенко А. М., Артеменко О. Ю. Двохвильвий флуоресцентний метод реєстрації кальцієвих сигналів в клітинах // Фізика живого. – 2005 — №1, 13. — С. 91-96 (Особистий внесок здобувача – опрацювання літератури, виділення тимоцитів, навантаження клітин зондом, вимірювання концентрації Са²⁺ у цитозолі тимоцитів, аналіз та інтерпретація отриманих даних).

   Semenov Yu.V. yma V.L., Artemenko O.Yu. Studies of hydrogen peroxide action on intracellular calcium concentration in the rat thymocytes // Thesis on Conference for young scientists phD students and students on molecular biology and genetics, 23-25 September 2003, Kyiv, P. 43.

   Semenov Yu.V. yma V.L., Artemenko O.Yu. Studies of hydrogen peroxide action on cytosolic and mitochondrial calcium concentration in the rat thymocytes // Установчий з’їзд Українського товариства клітинної біології, 25-28 квітня 2004 р., Львів, С. 26.

   Артеменко О.Ю., Семенов Ю.В. Зима В.Л. Флуоресцентний аналіз цитозольного і мітохондріального кальцієвого транспорту в тимоцитах при зміні температури // Тези доповідей I наукової конференції „Проблеми біологічної і медичної фізики”, 20-22 вересня 2004 р., Харків, С.147.

   16