Ніколенко Ольга Юріївна. Порушення імунітету, оксидантної і антиоксидантної систем при хронічному гепатиті С (клініко-експериментальне дослідження). : Дис... канд. наук: 14.03.08 - 2009.
Анотація до роботи:
Ніколенко О.Ю. Порушення імунітету, оксидантної і антиоксидантної систем при хронічному гепатиті С (клініко-експериментальне дослідження). – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.03.08 – імунологія та алергологія – Донецький національний медичний університет ім.М.Горького МОЗ України, Донецьк, 2009 р.
Дисертація присвячена вивченню взаємозв’язку між порушеннями імунної, оксидантної і антиоксидантної системами у хворих на хронічний вірусний гепатит С та створенню моделі на тваринах, на котрій доказана ефективність лікування циклофероном та гомологічними клітинами печінки. У хворих виявлені значні порушення імунної реактивності з порушенням Т-системи імунітету та аутоімунними реакціями гуморального і клітинного типів, підвищення активності оксидантної системи та зниження – антиоксидантної системи, котрі пов’язані поміж собою.
У роботі на підставі імунологічних, біохімічних і експериментальних досліджень представлено обґрунтування та рішення актуальної науково-практичної задачі – підвищення ефективності корекції дисбалансу імунної системи при хронічному гепатиті по типу С у модельному експерименті за рахунок введення гомологічної культури тканини печінки, що забезпечило покращення імунологічних і біохімічних показників.
1. У хворих на хронічний вірусний гепатит С розвивається дисбаланс імунної системи зі статистично достовірними змінами: пригніченням Т-клітинної ланки (CD3+-клітин (51,30±1,35)% (р<0,001), CD4+-клітин (31,0±0,96)% (р<0,001), CD8+-клітин (20,2±0,51)% (р=0,0032) і значною активацією В-клітинної ланки, про що свідчить як зростання кількості CD22+-клітин (23,4±0,51)% (p<0,001), так і підвищення їхньої функціональної активності (гіперглобулінемія А (2,5±0,04) г/л (p<0,001), М (1,4±0,03) г/л (p<0,001) , G (14,8±0,23) г/л (p<0,001) і зростання вмісту ЦІК (0,67±0,030) г/л (p<0,001)).
2. Виявлено аутоагресію у хворих на хронічний вірусний гепатит С до багатьох тканин організму: печінки, селезінки, тимуса, нирок, нативної та денатурованої ДНК (за даними РПГА, кількість аутоантитіл зростає від 3 до 4,8 разів в порівнянні з контролем).
3. Встановлено суттєве пригнічення факторів неспецифічного захисту у хворих на хронічний вірусний гепатит С, про що свідчить достовірне зменшення відносної та абсолютної кількості NK (CD16+) (14,9±0,42)% (p<0,001), зниження показників завершеного фагоцитозу – ФАН90хв (36,5±1,59)%(p<0,001), а також зниження потенціалу нейтрофілів до активації по типу кисневозалежного метаболізму в НСТ-тесті (17,5±0,55)% (p=0,0026).
4. Зміни імунного профілю при хронічному вірусному гепатиті С виникають на тлі дисбалансу оксидантно - антиоксидантної систем: значного перевищення контрольних рівнів оксидантів – дієнових кон’югатів і малонового діальдегіду та зменшення антиоксидантів – антиокислювальної активності плазми, супероксиддисмутази, -токоферолу та каталази. Активність ферменту пуринового обміну – ксантиноксидази значно перевищувала контрольний рівень, забезпечуючи зростання вмісту сечової кислоти, яка має антиоксидантні властивості.
5. Існують тісні кореляційні зв’язки у хворих на хронічний вірусний гепатит С між показниками імунної, оксидантної та антиоксидантної систем, а також активністю гепатиту. Концентрації Ig А, Ig М, Ig G і циркулюючих імунних комплексів були прямо пов’язані з активністю хвороби (r=+0,40, p<0,001), а підвищення активності гепатиту призводило до збільшення рівня циркулюючих імунних комплексів (p=0,001). Розвиток цирозу печінки чинив вплив на підвищення рівня аутоантитіл до печінки (p=0,0031). Зниження супероксиддисмутази статистично значуще збігалося зі зменшенням відносних показників Т-клітинного імунітету та збільшенням кількості Ig М і Ig G, ЦІК, з найбільшим числом показників фагоцитозу. Каталаза мала зв’язки з найбільшим числом показників фагоцитозу та з багатьма показниками клітинного імунітету.
6. Створено модель по типу хронічного гепатиту С на щурах, яка включає морфологічні зміни у вигляді ушкодження гепатоцитів, запальних інфільтратів і склерозу, біохімічні та аутоімунні порушення, характерні для хронічного гепатиту, що викликається вірусом гепатиту С. Лікування експериментальних щурів циклофероном суттєво впливало на збільшення лейкоцитів, лімфоцитів, моноцитів, на підвищення ФАН в НСТ-тесті (p<0,001), зменшення вмісту сечової кислоти (p<0,001), сприяло покращенню РГММ до усіх антигенів. Крім того, статистично значуще зменшувались активність аланінамінотрансферази, вміст загального білірубіну та малонового діальдегіду і збільшувався рівень загального білка.
7. Лікування експериментальних тварин гомологічними клітинами печінки було найбільше ефективним і призводило до суттєвого збільшення лейкоцитів, лімфоцитів, моноцитів, до підвищення ФАН в НСТ-тесті, викликало зменшення вмісту сечової кислоти (p<0,001). Статистично значуще зменшувались титри аутоантитіл до антигенів печінки (2,4±0,22)у.о. (р<0,001), селезінки (1,8±0,15)у.о. (p<0,001), нирки (1,6±0,16)у.о. (p<0,001), тимуса (1,2±0,22)у.о. (p=0,0049), нДНК (1,4±0,15)у.о. (p<0,001) і дДНК (1,8±0,24)у.о. (р=0,0018), а також зменшилася сенсибілізація до антигенів тканини печінки, селезінки, нирки, тимуса, нДНК в реакції гальмування міграції макрофагів. Внаслідок лікування активність аланінамінотрансферази, аспартатамінотрансферази та вміст загального білірубіну зменшувались, а рівень загального білка збільшувався. Вміст дієнових кон’югатів і малонового діальдегіду зменшувався. Активність каталази підвищувалась, а ксантиноксидази – знижувалась.
Публікації автора:
Николенко О. Ю. Особенности моделирования хронического гепатита С / О. Ю. Николенко // Вестник гигиены и эпидемиологии. – 2006. – Т.10, №1. – С.139-143.
Василенко И. В. Морфологические и биохимические изменения при моделировании хронического гепатита С / И. В. Василенко, О. Ю. Николенко // Вестник гигиены и эпидемиологии. – 2007. – Т.11, №1. – С.113-116.
Автором самостійно виконано формування комп'ютерної бази даних, статистична обробка, розробка дизайну дослідження та узагальнення результатів.
Николенко О. Ю. Особливості та зв'язок імунних показників з клініко-біохімічними показниками у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Николенко // Вестник гигиены и эпидемиологии. – 2008. – Т. 12, №1. – С.147-152.
Николенко О. Ю. Связь уровня малонового диальдегида с отдельными показателями иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С / О. Ю. Николенко // Український медичний альманах. – 2008. – Т.11, №1 (додаток). – С.196-198.
Імунні показники і антиоксидантна система у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Ніколенко, О. Д. Якубенко, І. А. Зайцев, О. А. Трунова, А. В. Ніколенко // Вестник гигиены и эпидемиологии. – 2008. – Т.12, №2. – С.262-266.
Автором самостійно виконано формування комп'ютерної бази даних, статистична обробка, узагальнення результатів, написання висновків.
Ніколенко О. Ю. Особливості та зв’язок автоімунних показників з клініко-біохімічними даними у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Ніколенко // Одеський медичний журнал. – 2008. – Т.108, №4. – С.39-41.
Николенко О. Ю. Динамика лейкоцитов крови после лечения крыс с моделью хронического гепатита С / О. Ю. Ніколенко // Питання експериментальної та клінічної медицини: Зб. статей. – Донецьк, 2006. – Вип.10, Т.1. – С.131-137.
Особливості імунітету і загальна антиокислювальна активність плазми крові у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Ніколенко, О. Д. Якубенко, В. Ю. Ніколенко, Г. В. Тищенко, А. В. Ніколенко // Питання експериментальної та клінічної медицини: Зб.статей. – 2008. – Вип. 12, Т.1. – С.83-88.
Автором самостійно виконано формування комп'ютерної бази даних, статистична обробка, розробка дизайну дослідження та узагальнення результатів.
9. Связь диеновых конъюгатов с отдельными показателями иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С / О. Ю. Николенко, Е. Д. Якубенко, В. Ю. Николенко, О. А. Трунова, А. В. Николенко // Bulletin of the International Scientific Surgical Association. – 2008. – Vol.3, №1. – P.82-83.
Автором самостійно виконано формування комп'ютерної бази даних, статистична обробка, брала участь у розробці дизайну дослідження та в узагальненні результатів.
10. Иммунопатологические механизмы и нарушения оксидантных и антиоксидантных систем при хроническом вирусном гепатите С / Ю. И. Николенко, О. Ю. Николенко, И. Н. Урюпин, В. Ю. Михайличенко, О. А. Трунова, О. В. Шевченко // Вестник неотложной и восстановительной медицины. – 2003. – Т.4, № 4. – С. 666-671.
11. Современные проблемы в диагностике хронического вирусного гепатита С / О. Ю. Николенко, В. Ю. Михайличенко, Ю. И. Николенко, И. Н. Урюпин, А. Ю. Шкиренко // Вестник неотложной и восстановительной медицины. – 2005. – Т.6, №1. – С. 146-150.
Хирургические аспекты лечения хронических гепатитов и циррозов печени / В. К. Гринь, В. Ю. Михайличенко, О. Ю. Николенко, Ю. И. Николенко, С. В. Ярощак, Д. А. Коберник // Вестник неотложной и восстановительной медицины. – 2004. – Т.5, № 4. – С. 739-746.
Связь уровня малонового альдегида с возрастом и отдельными показателями иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С / О. Ю. Николенко, В. Ю. Николенко, А. В. Тищенко, А. В. Николенко // Проблемы геронтологии и гериартрии-2008: Материалы IV научно-практической конференции Северо-Западного федерального округа в рамках IV Северного социально-экологического конгресса, г. Сыктывкар, 229-30 апреля 2008 г. – Сыктывкар-Санкт-Петербург, 2008. – С. 57-60.
Николенко О. Ю. Влияние трансплантации гомологичной культуры клеток печени на лейкоциты крови крыс на модели хронического гепатита С / О. Ю. Николенко // Актуальні проблеми гігієни праці, професійної патології і медичної екології Донбасу: Збірник статей. – Донецьк: Каштан, 2005. – С. 319-324.
Николенко О. Ю. Влияние трансплантации гомологичной культуры клеток печени на лейкоциты крови модели хронического гепатита / О. Ю. Николенко, О. А. Трунова, Н. В. Жадинский // Вестник гигиены и эпидемиологии. – 2006. – Т.10, №1. прил. – С.91-94.
Особливості впливу лікування гомологічними клітинами печінки хронічного гепатиту С на оксидантну і антиоксидантну системи в експерименті / О. Ю. Ніколенко, О. Д. Якубенко, В. Ю. Ніколенко, Г. В. Тищенко, А. В. Ніколенко // Інфекції в практиці клініциста. Антибактеріальна та антивірусна терапія на догоспітальному та госпітальному етапах: Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю 27-28 березня 2008 року, під загальною редакцією проф. Малого В.П., проф. Кратенко І.С. – Харків, 2008. – С. 249-250.
Ніколенко О. Ю. Роль циркулюючих імунних комплексів у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Ніколенко // II Всеукраїнської науково-практичної конференції «Сучасні методичні підходи до аналізу стану здоров'я» (17-18 березня 2008 р.). – Луганськ, 2008. – С. 18.
Ніколенко О. Ю. Особливості клітинного імунітету у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Ніколенко, О. А. Трунова, В. Ю. Ніколенко // Актуальні питання профілактики, діагностики та лікування професійних захворювань: Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю 8-9 листопада 2007 року. – Донецьк, 2007. – С. 119.
Ніколенко О. Ю. Спосіб моделювання хронічного активного гепатиту типу С / О. Ю. Ніколенко, О. А. Трунова, В. Ю. Ніколенко // Тези доповідей: „XI конгрес Світової Федерації Українських Лікарських Товариств”, 28-30 серпня 2006 року, м.Полтава. – Київ : КПП ”Друкар”. – С. 431.
Николенко О. Ю. Лимфоциты крови крыс при лечении циклофероном и трансплантацией клеток печени на модели хронического активного гепатита С / О. Ю. Николенко // VIІ Українська науково-практична конференція з актуальних питань клінічної і лабораторної імунології, алергології та імунореабілітації. – м.Київ. 6-7 жовтня 2005 р. – С. 102-103.
Николенко О. Ю. Особливості рівнів аутоантитіл у хворих на хронічний вірусний гепатит С / О. Ю. Николенко // Актуальні проблеми клінічної, експериментальної, профілактичної медицини, стоматології та фармації : Програма та матеріали 70-ої міжнародної науково-практичної конференції молодих вчених (9-11 квітня 2008 р., м. Донецьк, Україна). – Донецьк: Каштан, 2008. – С.33.
Ніколенко В. Ю. Деклараційний патент України №15752 МПК G09B23/28 Спосіб моделювання хронічного гепатиту С / В. Ю. Ніколенко, Ю. І. Ніколенко, О. Ю. Ніколенко. – Пріоритет від 17.07.2006 р. – Опубл. Бюл. №7.
Автором самостійно виконано формування комп'ютерної бази даних, статистична обробка, розроблення дизайну способу моделювання та узагальнення результатів.
Список скорочень
АОА – антиокислювальна активність плазми крові
ГВ – гепатит В
ГС – гепатит С
ГГС – гострий гепатит С
ІАН – індекс активності нейтрофілів в НСТ-тесті
КО – ксантиноксидаза
К – каталаза
kKW – критерій Крускала-Уолліса
kW – критерій Уілкоксона
МДА – малоновий діальдегід
Mk – медіанний критерій
MW – критерій Манна-Уітні
НСТ-тест – тест по відновленню нітросинього тетразолію
