Анотація до роботи:

Ружинська О.Е. Морфофункціональна характеристика гемопоетичних клітин, особливості їх апоптозу та проліферативної активності при мієлодиспластичному синдромі. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.01.31 – гематологія та трансфузіологія. – ДУ «Інститут гематології та трансфузіології АМН України», Київ, 2007.

У дисертації наведено матеріал щодо морфологічних, цитохімічних, імунофенотипових особливостей, рівня експресії апоптоз-асоційованих маркерів (анексіну V, АГ CD95, білка Bcl-2) та параметрів КЦ гемопоетичних клітин у хворих на різні форми МДС.

Для хворих було характерним порушення морфологічних ознак клітин КМ і ПК, їх ензимохімічної організації та рівня експресії деяких поверхневих антигенів, що відображає функціональну неповноцінність гемопоетичних клітин при МДС.

Відмічено високий рівень апоптозу гемопоетичних клітин у хворих на МДС, що є їх маркерною ознакою. Встановлено залежність кількості апоптотичних клітин в КМ пацієнтів від форми захворювання. Даний параметр має достовірне прогностичне значення.

Однією з причин експансії пухлинного клону є значне зростання рівня експресії антиапоптотичного білка Bcl-2 бластними клітинами при зниженні кількості CD95⁺-клітин в процесі прогресування захворювання. При цьому було відмічено перевищення кількості Bcl-2⁺-клітин над кількістю апоптотичних клітин у хворих на МДС.

Отримані дані щодо високого проліферативного потенціалу гемопоетичних клітин та значної варіабельності показників їх КЦ у хворих на МДС. Параметри КЦ та наявність анеуплоїдної популяції клітин мають прогностичне значення для оцінки загальної виживаності хворих.

У дисертації наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукової задачі щодо ролі апоптозу і проліферативної активності в патогенезі МДС, які недостатньо вивчені внаслідок біологічної неоднозначності їх регуляторних процесів, значної варіабельності проявів і складнощах верифікації патології.

1. Підтверджено гіпотезу щодо ролі порушення регуляції апоптозу як однієї з ключових ланок патогенезу МДС. Встановлено підвищення кількості апоптотичних клітин при МДС в порівнянні з практично здоровими особами і ГМЛ. Посилений апоптоз гемопоетичних клітин є основною відмітною ознакою у хворих на МДС.

2. Виявлено дисбаланс про- і антиапоптотичних процесів в гемопоетичних клітинах КМ хворих на МДС, що характеризується зміною рівнів експресії апоптоз-ассоційованих маркерів в порівнянні з контролем: антиапоптотичного білка Bcl-2 (підвищенням в 3 рази) і рецепторної молекули FAS (зниженням в 1,2 рази). У хворих на ГМЛ рівень експресії білка Bcl-2 гемопоетичними клітинами зростав у порівнянні з аналогічним показником при МДС (у 1,5 рази) та в порівнянні з контрольною групою (у 5 разів).

3. Встановлено, що підвищений рівень експресії білка Bcl-2 спостерігався в популяції незрілих клітин КМ хворих на МДС, тоді як апоптотичному процесу піддавалися зрілі клітини всіх паростків гемопоезу.

4. Виявлено прогностичну значимість апоптотичного індексу для оцінки загальної виживаності хворих на МДС: збільшення кількості апоптотичних клітин понад 20% порогового значення корелює зі сприятливим прогнозом.

5. Доведено, що МДС є захворюванням, яке характеризується не тільки збільшеним рівнем апоптозу, але й високим проліферативним потенціалом, що відрізняється значною варіабельністю. Параметри клітинного циклу і плоїдності при МДС є важливими маркерами ступеня злоякісності захворювання, а також мають прогностичне значення для оцінки загальної виживаності хворих. Встановлено, що збільшення кількості клітин у фазі спокою G0/1 відповідає накопиченню пухлинної маси (бластних клітин), а високий проліферативний потенціал є притаманним більш зрілим мієлоїдним клітинам.

6. Виділено прогностично маркерні параметри клітинного циклу і плоїдності. Показано, що ознаками несприятливого прогнозу загальної виживаності хворих на МДС є: величина проліферуючого пулу гемопоетичних клітин S+G2/M менша за 14,6%, фаза спокою G0/1 більша за 85%, значення цитокінетичного показника більше за 6,2, а також наявність анеуплоїдної популяції клітин.

7. Констатовано наявність взаємозв’язаних з апоптоз-ассоційованими маркерами кількісних і якісних змін морфофункціональних характеристик гемопоетичних клітин у хворих на МДС, які корелюють з несприятливим прогнозом захворювання: вірогідне звуження гранулоцитарного паростка кровотворення (менше 33%); зниження рівня активності МП в зрілих клітинах мієлоїдного ряду з одночасним підвищенням в них активності КФ і появою відсутньої в нормі НЕ; збереження аномально високої експресії антигену клітин-попередників CD33 і зниженої експресії активаційного антигену CD45 в популяції зрілих мієлоїдних клітин.

Публікації автора:

1. Комиссаренко В.Г., Братусь Г.Г., Зверкова А.С., Дарчук Г.Ф., Гащук А.П., Ружинская Е.Э., Джевадова И.В. Критерии нарушений противоопухолевой резистентности организма у лиц с дисгемопоэзом // Врачебное дело. – 1998. – №7. – С. 74-79.

Дисертант приймала участь в оцінці якісних ознак дисгемопоезу на підставі даних лейкограми хворих на МДС.

2. Исакова Л.М., Ружинская Е.Э., Гордиенко А.И. Роль апоптоза в патогенезе миелодиспластического синдрома // Гематологія і переливання крові. – 2004. – №32. – С. 37-47.

Дисертантом проведено аналіз літературних джерел щодо теми роботи, наведені дані інших дослідників, представлені особисті дані стосовно кількості апоптотичних клітин у хворих на МДС.

3. Ісакова Л.М., Шороп Є.В., Дарчук Г.Ф., Комісаренко В.Г., Ружинська О.Е., Гордієнко А.І. Особливості морфо-функціонального стану нейтрофільних гранулоцитів у хворих на МДС // Український журнал гематології та трансфузіології. – 2006. – №2. – С. 20-25.

Дисертантом оцінено рівень активності основних цитохімічних реакцій в нейтрофільних гранулоцитах хворих на МДС.

4. Ісакова Л.М., Дарчук Г.Ф., Зверкова А.С., Ружинская Е.Э.,
Шороп Е.В. Особенности гемодепрессии и цитохимических параметров клеток периферической крови и костного мозга у больных МДС в зависимости от формы заболевания // Український журнал гематології та трансфузіології. – 2006. – №6. – С. 16-20.

Дисертантом здійснено аналіз ензимохімічної організації гемопоетичних клітин КМ хворих на МДС.

5. Ружинская Е.Э., Исакова Л.М., Третяк Н.Н. Цитокинетические особенности гемопоэза больных МДС // Онкология. – 2007. – Т. 9, №1.
– С. 43-47.

Дисертантом охарактеризовано сучасний стан проблеми і наведено дані власних досліджень щодо параметрів клітинного циклу хворих на МДС.

6. Декл. патент на корисну модель UA №4616, МКП 7 G01N33/48, G01N33/53. Спосіб діагностики мієлодиспластичного синдрому:
Зверкова А.С., Ружинська О.Е., Ісакова Л.М.; Інститут гематології та трансфузіології АМН України. – №20040605010; Заявл. 24.06.2004; Опубл. 17.01.2005, Бюл. №1. – 3 с.

7. Перехрестенко П.М., Зверкова А.С., Дарчук Г.Ф., Братусь Г.Г., Комиссаренко В.Г., Коваль А.И., Гащук А.П., Ружинская Е.Э., Джевадова И.В. Миелодиспластический синдром и его проявления // Гематологія і переливання крові. – 1998. – №29. – С. 3-10.

8. Исакова Л.М., Гордиенко А.И., Третяк Н.Н., Ружинская Е.Э., Басова О.В., Борозенец Н.И. Динамика экспрессии FAS-рецептора на бластных клетках больных острой миелоидной лейкемией // Імунологія та алергологія. – 2000. – №4. – С. 54-55.

9. Зверкова А.С., Джевадова И.В., Дарчук Г.Ф., Комиссаренко В.Г., Ружинская Е.Э. Морфологические и цитохимические особенности клеток крови и костного мозга у лиц с дисгемопоэзом //Экспериментальная онкология. – 2000. – Vol. 22, suppl. – 1273.

10. Исакова Л.М., Зверкова А.С., Дарчук Г.Ф., Ружинская Е.Э., Гордиенко А.И. Особенности кроветворения у больных хроническим миеломоноцитарным лейкозом // Х з’їзд онкологів України. – Київ: ТОВ «Абсолют», 2001. – C. 258.

11. Ружинская Е.Э., Гордиенко А.И., Исакова Л.М. Изучение пролиферативной активности и апоптоза гемопоэтических клеток у больных с миелодиспластическим синдромом // Гематологія і переливання крові. – 2001. – №30. – С. 84.

12. Исакова Л.М., Гордиенко А.И., Ружинская Е.Э., Третяк Н.Н., Горяинова Н.В. Изучение маркеров апоптоза гемопоэтических клеток больных хронической миеломоноцитарной лейкемией // Рос. научно-практ. конф. «Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии». – Санкт-Петербург, 2002. – С. 115-116.

13. Зверкова А.С., Дарчук Г.Ф., Исакова Л.М., Гордиенко А.И., Ружинская Е.Э. Особенности гранулоцитарного ростка кроветворения у больных с миелодиспластическим синдромом (МДС) // Проблемы гематологии и переливания крови. – 2002. – №1. – С. 30.

14. Гордієнко А.І., Ружинська О.Е., Ісакова Л.М. Апоптоз мононуклеарів кісткового мозку та периферичної крові хворих на мієлодиспластичний синдром // Зб. наук. праць співр. КМАПО ім.
П.Л. Шупика. – 2004. – Вип. 13, кн. 3. – С. 207-211.

15. Ісакова Л.М., Ружинська О.Е., Павлюк Р.П., Гордієнко А.І., Третяк Н.М. Мієлодиспластичний синдром: перебіг захворювання в залежності від віку // ІV національний конгрес геронтологів і геріатрів України «Проблемы старения и долголетия». – Київ: ООО «Велес», 2005.
– Т. 14 (приложение). – С. 181.

16. Ружинская Е.Э., Исакова Л.М. Анализ клеточного цикла гемопоэтических клеток костного мозга и периферической крови больных миелодиспластическим синдромом и острой миелоидной лейкемией // Укр. ж. гематології та трансфузіології. – 2006. – №2 (додатковий). – С. 55-57.